上传时间: 2014-08-12
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第六章 蛋白质和DNA技术
血清蛋白的提取和分离
1.方法及原理
(1)方法:电泳法。
(2)原理:①各种蛋白质分子带电性质的差异;
②分子本身大小、形状的不同。
2.实验操作程序
(1)点样:用微量加样器取新制血清,小心加到电泳样品槽的胶面上。
(2)电泳:打开并调节稳压稳流电泳仪进行电泳。
(3)染色:用质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液对凝胶进行染色。
(4)脱色:用体积分数为7%的醋酸溶液脱色。
(5)制干胶板:保存液浸泡凝胶板后,放在两层透气玻璃纸中间自然干燥。
【高考警示钟】
1.电泳时,带电的颗粒向与其电性相反的电极方向移动。
2.电泳时,蛋白质所带的电荷数越多,移动得越快;电荷数相同时,分子量越小,则移动越快。
DNA片段的扩增
1.细胞内DNA复制与PCR技术的比较
在解旋酶作用下边解旋边复制
95 ℃高温解旋,双链完全分开
DNA解旋酶、DNA聚合酶
耐高温的DNA聚合酶
RNA
人工合成的DNA单链
体内温和条件
高温
①需提供DNA复制的模板;
②四种脱氧核糖核苷酸作原料;
③子链延伸的方向都是从5′端到3′端
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