实验八 叶绿体中色素的提取和分离
一．实验原理：
色素提取原理：
利用相似相溶原理，色素可以溶解于酒精、丙酮等有机溶剂中，形成色素液。
色素分离原理：
    由于四种色素在层析液的溶解度不同，因而四种色素在滤纸上的扩散速度也不同，从而将它们分离开来。21·cn·jy·com
二．实验材料：
    新鲜的绿色叶片、干燥的定性滤纸、烧杯、研砵、玻璃漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、小试管、培养皿盖、药勺、量筒、天平。www.21-cn-jy.com
    药品：丙酮、层析液、二氧化硅、碳酸钙。
三．实验过程：
  （一）。制备色素滤液：
1．取叶：
称取5克新鲜的绿色植物叶片，然后剪碎，放入研砵中；
2。研磨：
A．研砵中分别加入以下物质：
二氧化硅：为了使研磨充分；
碳 酸钙：保护色素免受破坏；
丙  酮：作为色素的溶剂。
思考题：
研磨时要使叶绿素能够提取出来，要破坏多少层膜？
提示：应该是3层，一层细胞膜，两层叶绿体膜。
碳酸钙保护色素的原理是什么？
因为叶绿素极易分解，在研磨过程中，细胞结构被破坏，细胞液中的有机酸释放出来，很容易破坏叶绿素分子，为了缓冲研磨液中的PH值一，可以加入碳酸钙，来中和释放出来的有机酸，从而避免了叶绿素被破坏。2·1·c·n·j·y
B．充分迅速地研磨；
  充分是为了彻底破坏细胞结构，迅速是为了防止丙酮挥发；
防止挥发采取的措施：
在研砵上加一个中间有洞的纸，把玻璃棒插在中间研磨可以减少挥发。
3．取滤液：
在一支试管上插入一个小漏斗，中间用脱脂棉或者尼龙布作为过滤用，迅速倒入研磨滤液，进行过滤，然后在试管口用棉花塞紧。【来源：21·世纪·教育·网】
思考题：
为什么要迅速倒入？为什么要用棉花塞紧试管管口？
 同样为了防止丙酮挥发；
 同时由于色素极容易被光和空气所破坏，所以要避光和隔绝空气保存。
（二）制备滤纸条：
1。干燥处理过的定性滤纸；
为何干燥处理？
有利于层析液在滤纸上的扩散；
2．规格：
6㎝×1㎝
3．处理：
在滤纸的一端，剪去两角，大约距1㎝处，角度约45°；
            剪角的目的是什么？
            因为在靠近两侧的层析液扩散的速度比较快，剪去两角后，扩大了两侧层析液扩散的距离，可以调整层析液扩散处于同